Sử dụng Domperidon và 17, 20P kích thích cá trê vàng (Clarias macrocephalus Gunther, 1864) sinh sản
TÓM TẮT
Nghiên cứu này nhằm đánh giá ảnh hưởng của domperidon và 17, 20 P đối với sự
thành thục và rụng trứng của cá trê vàng (Clarias macrocephalus Gunther, 1864).
Kết quả nghiên cứu sử dụng domperidon và 17, 20 P sinh sản cá trê vàng đã ghi
nhận hiệu quả gây chín và rụng trứng của liều 5 mg/kg domperidon trong lần tiêm
liều sơ bộ và 17, 20 P trong lần tiêm liều quyết định với liều 2 – 3,5mg/kg cho tỷ lệ
rụng trứng là từ 66,6 -79,3%. Để có kết quả tương tự, nếu liều sơ bộ là 10mg
Domperidon thì có thể liều quyết định 17,20P từ 2,5 – 3,5mg/kg và tỷ lệ rụng trứng
tương ứng từ 66,6 – 73,6. Có thể tiêm một lần duy nhất hỗn hợp 5mg domperidon với
2,5-3,5 mg 17,29P/kg hoặc 10mg domperidon với 2 - 2,5mg 17,20 P/kg cá cái đều
cho tỷ lệ cá rụng trứng khá cao: 33,3 – 66,6% Như vậy, ứng dụng domperidon và
17,20 P trong sinh sản cá trê vàng có thể giúp các nhà sản xuất giảm được chi phí do
vấn đề bảo quản các hormon là protein hoặc peptit dễ bị phân hủy bởi nhiệt độ cao
như kích dục tố và GnRH-A.
Trang 1
Trang 2
Trang 3
Trang 4
Trang 5
Trang 6
Trang 7
Trang 8
Trang 9
Tóm tắt nội dung tài liệu: Sử dụng Domperidon và 17, 20P kích thích cá trê vàng (Clarias macrocephalus Gunther, 1864) sinh sản
0 P ở các mức 2; 2,5; 3 và 3,5 mg/kg. Bảng 1. Liều lượng và phương pháp tiêm cá trong thí nghiệm 1, 2 và 3 Thí nghiệm Nghiệm thức Số cá cái Kích tố Motilium M Liều sơ bộ Liều quyết định Nhiệt độ nước Motilium (mg/kg) Não thùy (mg/kg) 17, 20 P (1 mg/kg) 1 1.1 15 5 - 3,5 27oC 1.2 15 5 - 3 1.3 15 5 - 2,5 1.4 15 5 - 2 ĐC.1 15 5 - 0 2 2.1 15 10 - 3,5 29,5oC 2.2 15 10 - 3 2.3 15 10 - 2,5 2.4 15 10 - 2 ĐC 2 15 10 - 0 3 3.1 15 - 0,5 3,5 29,5oC 3.2 15 - 0,5 3 3.3 15 - 0,5 2,5 3.4 15 - 0,5 2 ĐC 3 15 - 0,5 0 Ghi chú: ĐC: đối chứng. Mỗi nghiệm thức lặp lại 3 lần với 5 cá cái/ nghiệm thức). - Thí nghiệm 4: Được rút ra từ các nghiệm thức của thí nghiệm 1, 2 và 3 cho hiệu quả sinh sản cao nhưng liều lượng chất kích thích thấp nhất. Điều khác biệt trong thí nghiệm này là hai loại kích thích tố của từng nghiệm thức được trộn chung và tiêm 1 lần duy nhất. 2.2 Các chỉ tiêu theo dõi - Tỷ lệ rụng trứng (rụng cục bộ, rụng trứng róc) ở cá được tính là tỷ Tạp chí Nghiên cứu khoa học và Phát triển kinh tế Trường Đại học Tây Đô Số 01 - 2017 lệ giữa số cá rụng trứng trong tổng số cá tham gia sinh sản. - Sức sinh sản của cá (g/kg) được tính là khối lượng trứng thu được (g) trên tổng khối lượng cá cái (kg). - Thời gian hiệu ứng của cá đối với kích thích tố được tính từ sau lần tiêm quyết định (lần tiêm thứ 2). - Những chỉ tiêu sinh sản, ấp trứng như tỷ lệ thụ tinh, tỷ lệ nở được tính theo phương pháp truyền thống được sử dụng trong lĩnh vực sinh sản nhân tạo cá (Nguyễn Văn Kiểm và Phạm Minh Thành, 2013). 2.3 Phương pháp xử lý số liệu Sử dụng phần mềm Excel để tính toán các giá trị trung bình, ĐLC trong một nghiệm thức. So sánh sự khác biệt giữa các nghiệm thức bằng ANOVA và phép thử Ducan ở mức ý nghĩa p<0,05. 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1. Kết quả sinh sản cá trê vàng Thời gian hiệu ứng của cá trong các nghiệm thức khác nhau (Bảng 2). Trong đó thời gian hiệu ứng trung bình của cá đối với kích thích tố ở thí nghiệm 1 ngắn nhất (3 giờ 42 phút) và dài nhất ở thí nghiệm 2 (9 giờ 37 phút). Thời gian hiệu ứng của cá ở thí nghiệm 2 dài nhất có thể do mức độ đồng đều của các tế bào trứng không cao và có thể đã xảy ra phản ứng phụ trong quá trình trứng chín do liều lượng 10 mg Motilium quá cao. Ở các nghiệm thức đối chứng (không tiêm 17, 20P) tỷ lệ cá không rụng trứng tăng dần từ 55,6% (ở nghiệm thức đối chứng 1) đến 100% (ở nghiệm thức đối chứng 3). - Kết quả kích thích cá trê vàng đẻ ở thí nghiệm 1 Tỷ lệ cá rụng trứng thấp nhất ở nghiệm thức 1.4 (66,6%) và khác biệt (P<0,05) so với các nghiệm thức còn lại. Một điều cần lưu ý là cá ở thí nghiệm 1 được tiêm 5 mg Motilium-M/kg (lượng 17,20P tương đương với cá ở thí nghiệm 2 và 3) nhưng tỷ lệ cá rụng trứng róc luôn cao hơn (bảng 2). Điều đó chứng tỏ nếu cá trê vàng đã thành thục thì chỉ cần liều tối thiểu 5mg Motilium là đủ kích thích não thùy tiết ra kích thích tố gây ra quá trình chín trứng và rụng trứng khi có tác dụng kết hợp của 17,20P. Nguyễn Tường Anh (1999) cũng cho rằng, sự chín và rụng trứng là hai quá trình sinh lý khác nhau nhưng sự rụng trứng có thể diễn ra theo quán tính nếu các tế bào trứng chín đồng loạt. 218 Tạp chí Nghiên cứu khoa học và Phát triển kinh tế Trường Đại học Tây Đô Số 01 - 2017 Bảng 2. So sánh một số chỉ tiêu sinh sản của cá trê vàng ở thí nghiệm 1, 2, 3 TN NT Thời gian hiệu ứng (h) Tỷ lệ rụng trứng (%) Sức sinh sản (g/kg) Tỉ lệ thụ tinh (%) Tỉ lệ nở (%) Rụng róc Rụng cục bộ Không rụng 1 ĐC 1 3,0 44,4 - 55,6 43,5±2,5 a 46,3a±9,45 57,6±8,55 1.1 3,2 73,6b 26,4b - 65,6±2,4b 88,8b±6,82 93,8c±3.65 1.2 3,5 73,6b 26,4b - 65,8±3,1b 81,1b±5,75 89,3b±4,30 1.3 3,5 79,3c 20,7a - 65,8±3,1b 77,3b±6,21 83,2b±4,45 1.4 3,5 66,6a 33,4c 54,2±2,5b 70,3b±7,15 82,0b±4,55 TB 3h42 73,27 23,52 62,9 2 ĐC.2 11,5 - 26,6a 73,4 36,7 a 0 0 2.1 7,3 66,6a 33,4b - 44,3±2,6a 78,5b±3,45 88,7c±4,58 2.2 8,5 66,6a 33,4b - 43,4±3,1b 73,9b±5,35 79,4b±5,55 2.3 11,20 73,6b 26,4a - 43,4±2,5b 63,8a±4,61 17,8a±8,26 2.4 10,5 - 46,7c 53,3 36,6±3,7a 0 0 TB 9h37 68,93 34,97 32,7 3 ĐC.3 - 0 0 100 0 0 0 3.1 6,0 66,6b 33,4b - 63,3±3,6c 82,5c±5,55 91,0c±4,61 3.2 6,0 66,6b 33,4b - 53,3±4,2b 75,2c±7,34 82,3b±4,55 3.3 8,5 33,3a 33,3b 33,4 53,3±3,4b 48,3b±8,43 75,4b±5,65 3.4 11,0 33,3a 22,2b 44,5 20,4±2,6a 22,7a±8,32 17,7a±6,75 TB 8h20 49,45 31,07 38,95 47,6 Ghi chú: Những giá trị trong cùng thí nghiệm, trong cùng một cột theo sau bởi các chữ cái khác nhau thì khác biệt có ý nghĩa thống kê ở mức P<0,05; TB: trung bình. TB: giá trị trung bình của các nghiệm thức ngoại trừ nghiệm thức đối chứng. Cá rụng trứng cục bộ là những cá vuốt được ít trứng - Ở thí nghiệm 2 Cá ở nghiệm thức 2.4 nhận liều 17,20P thấp nhất (2,0mg/kg) đã dẫn tới tỷ lệ cá không rụng trứng cao nhất (53,3%),và tỷ lệ cá rụng trứng cục bộ (46,7%), trong khi đó cá ở các nghiệm thức còn lại đều không ghi nhận kết quả tương tự. Tỷ lệ rụng trứng róc của cá cao nhất 73,6% thuộc về nghiệm thức 2.3 (cá tiêm liều sơ bộ 10mg DOM và 2,5mg 17,20P/kg liều quyết định), tỷ lệ cá rụng trứng róc ở nghiệm thức 2.1, 2.2 đều thấp hơn (bảng 2). Có thể cho rằng, đối với cá trê vàng khi đã thành thục thì chỉ cần một lượng kích thích tố (yếu tố gây rụng trứng) vừa đủ ở mức thấp đã đủ khả năng gây rụng trứng sau khi nhận một liều tiêm sơ bộ là chất có khả năng kích thích não thùy tiết chất gây chín trứng là Motilium-M. Ngoài ra cũng có thể do cá có khối lượng nhỏ (150g/con) nên lượng kích thích tố cần cho quá trình rụng trứng cũng thấp. Phạm Quốc Hùng và Nguyễn Tường Anh, (2011), 219 Tạp chí Nghiên cứu khoa học và Phát triển kinh tế Trường Đại học Tây Đô Số 01 - 2017 Phạm Minh Thành và Nguyễn Văn Kiểm (2009) cũng cho rằng, lượng kích thích tố tiêm cho cá tăng theo kích thước cá cho đẻ. - Ở thí nghiệm 3 Tỷ lệ cá rụng trứng trung bình 49,45% thấp hơn so với cá ở thí nghiệm 1 và 2. Nhưng tỷ lệ cá rụng trứng róc ở nghiệm thức 3.1 và 3.2 cao gấp 2 lần so với nghiệm thức 3.3 và 3.4. Có thể do cá ở nghiệm thức 3.1, 3.2 nhận liều 17,20P cao hơn. Như vậy, vai trò của 17, 20P đã có tác dụng chính đến tỷ lệ cá rụng trứng và đẻ trứng sau khi chịu sự tác động của liều sơ bộ là não thuỳ ở các nghiệm thức như nhau (0,5mg). Kết quả thể hiện rõ nhất ở nghiệm thức đối chứng 3 khi tất cả cá cái đều không rụng trứng (cá không được tiêm 17,20P ở liều quyết định). Ngoài ra, ở cả ba thí nghiệm đều có tỷ lệ cá rụng trứng cục bộ hoặc không rụng trứng (nghiệm thức 3.3, 3.4). hiện tượng như vậy thường xảy ra đối với cá cho đẻ đầu vụ (tháng 3-5) và cuối vụ (tháng 8-10). Theo Tan-Fermin et al (2001) thì tất cả cá trê vàng cái đều rụng trứng khi sử dụng chất kích thích tiêm cho cá vào mùa vụ sinh sản tự nhiên nhưng tỷ lệ rụng trứng chỉ là 60% nếu tiêm chất kích thích sinh sản không vào mùa vụ cá sinh sản. 3.2. Kết quả sinh sản cá trê vàng khi tiêm một liều hỗn hợp kích thích tố Sau khi có kết quả nghiên cứu từ thí 3 thí nghiệm, thí nghiệm thứ 4 được thiết lập từ nghiệm thức 1.3, 2.3 và 3.1 (bảng 3) Có thể nhận thấy các chỉ tiêu sinh sản của cá trong thí nghiệm giảm dần, trong đó tỷ lệ cá rụng trứng, năng suất trứng, tỷ lệ thụ tinh và tỷ lệ nở trong nghiệm thức 4.3 thấp nhất và khác biệt có ý nghĩa với nghiệm thức 4.1 (P<0,05). Bảng 3. Kết quả tiêm một lần hỗn hợp 17, 20 P + DOM hoặc não thuỳ cá trê vàng Nghiệm thức Thời gian hiệu ứng Tỷ lệ rụng trứng (%) sức sinh sản (g.trứng/kg) Tỷ lệ thụ tinh (%) Tỷ lệ nở (%) 4.1: 5mg DOM+ 2,5mg 17,20P 8h45 66.6± 4,21b 45,9±5,55b 76,8±3,55b 76,6±5,60b 4.2: 10mg DOM + 2,5mg 17,20P 7h35 66,6±6,45ab 32,5±7,23ab 71,3±6,15b 73,1±6,45b 4.3: 0,5mg NT+3,5mg 17,20P 9h30 33,3±6,41a 25,8±4,35a 67,2±5,33a 69,3±3,55a Ghi chú: NT: não thùy, trong cùng một cột, các giá trị có cùng ký tự thể hiện không có sự sai khác có ý nghĩa (P>0,05). Điều kiện nhiệt độ thí nghiệm là 28,5-29,5oC 220 Tạp chí Nghiên cứu khoa học và Phát triển kinh tế Trường Đại học Tây Đô Số 01 - 2017 Khi so sánh tỷ lệ cá rụng trứng ở thí nghiệm 1, 2 và 3 khi dùng cùng chủng loại và cùng liều kích thích tố có thể nhận thấy việc tiêm 2 lần (liều sơ bộ và liều quyết định) đã cho giá trị trung bình các chỉ tiêu sinh sản cao hơn so với trường hợp trộn chung các hoạt chất để tiêm một lần. Một điều đáng lưu ý ở đây là khi chỉ tiêm một lần thì thời gian hiệu ứng có dài hơn trường hợp tiêm 2 lần, nhưng tổng thời gian kích thích sinh sản giảm, từ đó rút ngắn được thời gian giữ cá. Vì thế có thể giảm được một số hoạt động như giảm thời gian cho cá sinh sản, giảm chi phí điện, nước phục vụ có quá trình sinh sản của (Nguyễn Tường Anh và ctv, 2003). Ngoài ra liều sơ bộ 10mg DOM/kg có thể giảm xuống tương đương nghiệm 1 là 5mg DOM/kg. Vì kết quả sinh sản của hai nghiệm thức này không khác biệt (P>0,05). Như vậy, vấn đề cần nghiên cứu tiếp theo là lượng DOM dư thừa (5mg) sẽ biến đổi như thế nào sau khi cá đẻ xong? 4. KẾT LUẬN Có thể kích thích cá trê vàng sinh sản với liều sơ bộ bằng Domperidon 5 mg hoặc à liều quyết định bằng 17,20 P từ 2-3,5mg/kg đều cho các tỷ lệ cá rụng trứng róc cao (73,6-73,9). Nếu domperidon ở liều sơ bộ là 10 mg/kg thì 17, 20 P ở liều quyết định chỉ cần 2,5 mg/kg đã đủ gây rụng trứng ở cá trê vàng với tỷ lệ 73,3 %. Nếu sử dụng phương pháp tiêm 1 lần thì tỷ lệ cá rụng trứng thấp nhất ở nghiệm thức 4.1 (33,3%) trong khi đó tỷ lệ cá rụng trứng ở hai nghiệm thưc 4.1 và 4.2 tương đương nhau (66,6%). Vì domparidon là chất kích thích có tác dụng tới quá trình tiết kích tố của não thùy, vì vậy có thể chỉ cần một lượng thấp vừa đủ để kích thích não thùy hoạt động tiết kích thích tố. Do đó cần tiếp tục nghiên cứu liều lượng Domparidon thấp nhất ở liều sơ bộ và cơ chế biến đổi của lượng Domparidon dư thừa sau khi cá đẻ xong. TÀI LIỆU THAM KHẢO 1. Haider S. and Rao N. V., 1994. Induced spawning of maturing Indian catfish, Clarias batrachus (L.) using low doses of steroid hormones and salmon gonadotropin. Aquaculture and Fisheries Management 25: 401-408. 2. Jalabert B., B. Breton, E. Brzuska, A. Fostier, 1977. A new tool for induced spawning: The use of 17 -hydroxy-20- dihydroprogesterone to spawn carp at low temperature. Aquaculture 10: 353 – 364. 3. Jalabert B., Breton B. and Fostier A., 1978. Precocious induction of oocyte maturation and ovulation in rainbow trout (Salmo gairdneri): problems when using 17 -hydroxy- 20-dihydroprogesterone Ann. Biol. Biochim. Biophys. 18: 977- 984. 4. Nguyễn Dương Dũng và Nguyễn Tường Anh, 2003. Kích thích cá 221 Tạp chí Nghiên cứu khoa học và Phát triển kinh tế Trường Đại học Tây Đô Số 01 - 2017 chép sinh sản bằng 17 (- hydroxy – 20 (- dihydroprogesteron sau liều sơ bộ bằng LHRH-A.Tuyển tập Báo cáo Khoa học về Nuôi trồng Thủy sản tại Hội nghị Khoa học Toàn quốc lần thứ 2 24-25/11/2003. Nhà xuất bản Nông nghiệp 262-265. 5. Nguyễn Tường Anh, 1999. Một số vấn đề về nội tiết học sinh sản cá. Nhà xuất bản Nông nghiệp, 238 trang. 6. Nguyễn Tường Anh, 2005. Sử dụng tổ hợp 17, 20 P; 17 P với kích dục tố kích thích cá trê vàng sinh sản chỉ trong một lần tiêm. Tuyển tập Nghề cá Sông Cửu Long. 225- 229 7. Nguyễn Tường Anh và Phan Văn Kỳ, 2011. Dùng 17α, 20β- dihydroxy-4-pregnen- 3-one kích thích cá mè vinh (Barbodes gonionotus) và he vàng (Barbonymus altus) đẻ. Trong: Sinh sản nhân tạo cá ứng dụng hormon steroid (Phạm Quốc Hùng và Nguyễn Tường Anh chủ biên). Nhà xuất bản Nông nghiệp, 177-183. 8. Ohta H., Kagawa H., Tanaka H., Okuzawa K. and Hirose K., 1996. Changes in fertilization and hatching rates with time after ovulation induced by 17, 20- dihydroxy-4-pregnen-3-one in the Japanese eel, Anguilla japonica. Aquaculture 139: 291-301. 9. Phạm Quốc Hùng và Nguyễn Tường Anh, 2011. Sinh sản nhân tạo cá, ứng dụng hormon Steroid. Nhà xuất bản Nông Nghiệp. 10. Nguyễn Văn Kiểm và Phạm Minh Thành, 2013. Kỹ thuật sản xuất giống cá nước ngọt. Nhà xuất bản Đại học Cần Thơ, 151 trang. 11. Richter, C. J. J., Eding, E. H., and Roem, A. J., 1985. 17 - hydroxy-20-dihydroprogesterone – induced breeding of the African catfish, Clarias lazera (Burchell), without priming with gonadotropin. Aquaculture 44: 285 – 293. 12. Suzuki, K., E.S.P. Tan and B. Tamaoki, 1989. Change of steroidogenic pathways in the ovary of a tropical catfish, Clarias macrocephalus, Gunther, after HCG treatment. General and Comparative Endocrinology, Volume 76, Issue 2, Pages 223– 229. 13. Tan-Fermin, J. D., Marte, C. L., Adachi, S., & Yamauchi, K., 2001. Serum steroid hormones, reproductive and larval performance of the Asian catfish Clarias macrocephalus (Gunther) during the off- and peak reproductive seasons. In J. Y.-L. Yu (Ed.), Recent Advances in Comparative Endocrinology. Proceedings of the Fourth Congress of the Asia and Oceana Society for Comparative Endocrinology, May 14-18, 2000, Academia Sinica, Taipei, Taiwan, R.O.C. (pp. 288– 297). Taipei, Taiwan, R.O.C.: Institute of Zoology, Academia Sinica. 222 Tạp chí Nghiên cứu khoa học và Phát triển kinh tế Trường Đại học Tây Đô Số 01 - 2017 USING DOMPERIDONE AND 17-20P FOR INDUCED REPRODUCTION OF WALKING CATFISH (CLARIAS MACROCEPHALUS GUNTHER, 1864) Nguyen Van Kiem1 and Lam My Lan2 1Faculty of Applied Biology, Tay Do University 2Faculty of Aquaculture & Fisheries, Can Tho University (Email: nvkiem@tdu.edu.vn) ABSTRACT Effects of domperidone and 17, 20 P on final maturation and ovulation of walking catfish (Clarias macrocephalus Gunther, 1864) were investigated. The experiments showed that application of domperidone in the first injection with dose of 5mg/kg and of 17-20 P at levels of 2 - 3,5mg/ kg of female in the second injection gave the following ovulation rates of 66.6 – 79.3%. For the comparable success in case that the primlinary by domperidone at 10mg/kg of female, the resolving dosage by 17-20P could be higher of 2 mg/kg and accordingly the ovulation rates were from 66,6 to 73,6%. For 1 kg of C. macrocephalus female the combinations consisting of 5 mg of domperidone and 2 – 3 mg of 17-20P or 10 mg of domperidone and 2.5 mg of 17-20 P in a single injection also gave the positive results in breeding of C. macrocephalus. Thus, the application of domperidone and 17- 20 P in C. macrocephalus breeding could support the farmer to get rid of risk from storage of protein/peptide termolabile hormones as well as gonadotropins and gonadotropin releasing hormones. Keywords: Clarias macrocephalus, Domperidon, 17-20P 223
File đính kèm:
- su_dung_domperidon_va_17_20p_kich_thich_ca_tre_vang_clarias.pdf